一、检测范围 本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测液态奶样本中的伊维菌素/阿维菌素。 二、试剂盒组成 酶标板1块,96孔/板 标准液5瓶(1 mL/瓶): 0 ppb,2.5 ppb,7.5 ppb,22.5 ppb,67.5 ppb 酶标记物稀释液 …………………………………7mL 11×酶标记物浓缩液 …………………………0.7mL 底物液A ………………………………………7mL 底物液B………………………………………7mL 终止液……………………..…………………7mL 20×浓缩洗涤液………………………………30mL 2 ×浓缩复溶液………………………………30mL 说明书…………………..………………1份 三、使用单位需自备的设备及试剂 (1)仪器 微孔板酶标仪(450 nm/630 nm) 氮气吹干装置 振荡器 离心机 涡旋仪 粉碎机 电子天平(感量0.01 g) (2)器材 单道微量移液器:20 μL~200 μL,100 μL~1000 μL 多道微量移液器:30 μL~300 μL (3)试剂 乙腈、正己烷、无水硫酸钠、碱性氧化铝、去离子水 四、测定步骤: 1、将所需试剂和微孔板从冷藏环境中取出,在室温下平衡30 min,每种液体使用前均须摇匀。注意标准液均需做2个平行试验。 2、加标准品:加标准品/样本50 mL/孔到对应的微孔中,加入酶标记物50 mL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光反应30 min。 3、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加洗涤液 300μL/孔,每次浸泡15~30 s,充分洗涤4~5次,用吸水纸拍干。 4、显色:加入底物液A液50 mL/孔,再加底物液B液50 mL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15 min。 5、测定:每孔各加50 μL终止液,设定酶标仪在450 nm处,测定OD值(建议用450/630 nm双波长检测,在5 min内读完数据)。 五、试剂盒灵敏度、准确度、精密度 试剂盒灵敏度:2 .5ppb 样本较低检测限: 组织………………………………20 ppb 原奶………………………………5 ppb 回收率:90%±30% 精密度:试剂盒的变异系数均小于10% 六、贮藏条件及保存期 贮藏条件:在2~8 ℃保存试剂盒。 保存期:本试剂盒有效期为12个月。