一、检测范围 本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测出肌肉组织中的泰乐菌素药物。 二、提供的材料与试剂 酶标板1块,96孔/块 标准液5瓶:(1 mL/瓶) 0 ppb,1 ppb,3 ppb,9 ppb,27 ppb 酶标记物………………………………………………12 mL 抗体工作液……………………………………………7 mL 底物液 A……………………………………………7 mL 底物液 B ………………………………………………7 mL 终 止 液 …………………………………………7 mL 20×浓缩洗涤液………………………………………30 mL 5×浓缩复溶液………………………………………10 mL 三、使用单位需自备的设备及试剂 设备: 微孔板酶标仪450 nm/630 nm 振荡器 涡旋仪 旋转蒸发仪/氮气吹干装置 离心机 水浴锅 天平:感量0.01 g 刻度移液管:10 mL 试剂: 乙酸乙酯 (分析纯) 、正己烷(分析纯) 、去离子水 四、操作步骤: 1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30 min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔放入自封袋,保存于2~8℃。 3、 加标准品/样本:加标准品/样本50 mL/孔到对应的微孔中,然后加入泰乐菌素抗试剂50 mL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25 ℃避光环境中反应30 min。 4、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液250 mL/孔,充分洗涤4~5次,每次间隔10 s,用吸水纸拍干(拍干后未被*的气泡可用未使用过的枪头戳破)。 5、加酶标物:加入泰乐菌素的酶标物100 mL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30 min,取出重复洗板步骤4。 6、 显色:加入底物液A液50 mL/孔,再加底物液B液50 mL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应15 min。 7、 测定:加入终止液50 mL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450 nm处(建议用双波长450/630 nm检测,请在5 min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。 五、检测方法灵敏度、准确度、精密度 试剂盒灵敏度:1 ppb 回收率:90±30% 样本较低检测限: 方法一…………………………………………………20 ppb 方法二…………………………………………………1 ppb 精密度: 试剂盒的变异系数均小于10%。 六、贮藏条件及保存期 贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。 保存期:该产品有效期为12个月。